HE染色石蠟切片制作的基本過程
作者：未知 來源：生物秀 時間：2007-12-7
1、取材與固定：
從人或動物新鮮尸體上取下組織塊(一般厚度不超過0．5厘米)投入預先配好的固定液中(10％福爾馬林，Bouin氏固定液等)使組織、細胞的蛋白質變性凝固，以防止細胞死后的自溶或細菌的分解，從而保持細胞本來的形態結構。
2、脫水透明：
一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑，逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精，又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明，以二甲苯替換出組織塊的中酒精，才能浸蠟包埋。
3、浸蠟包埋：
將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中，放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進行包埋：先制備好容器(如折疊一小紙盒)，倒入已溶化的石蠟，迅速夾取已浸透石蠟的組織塊放入其中。冷卻凝固成塊即成。包埋好的組織塊變硬，才能在切片機上切成很薄的切片。
4、切片與貼片：
將包埋好的蠟塊固定于切片機上，切成薄片，一般為5—8微米厚。切下的薄片往往皺折，要放到加熱的水中燙平，再貼到載玻片上，放45℃恒溫箱中烘干。
5、脫蠟染色：
常用HE染色，以增加組織細胞結構各部分的色彩差異，利于觀察。蘇木精(Hematoxylin，H)是一種堿性染料，可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色，被堿性染料染色的結構具有嗜堿性。伊紅(Eosin，E)是一種酸性染料，能將細胞質染成紅色或淡紅色，被酸性染料染色的結構具有嗜酸性。染色前，須用二甲苯脫去切片中的石蠟，再經由高濃度到低濃度酒精，最后入蒸餾水，就可染色。
HE染色過程是：
①將已入蒸餾水后的切片放入蘇木精水溶液中染色數分鐘。
②酸水及氨水中分色，各數秒鐘。
③流水沖洗1小時后入蒸餾水片刻。
④入70％和90％酒精中脫水各10分鐘。
⑤入酒精伊紅染色液染色2—3分鐘。
6、脫水透明：
染色后的切片經純酒精脫水，再經二甲苯使切片透明。
7、封固：
將已透明的切片滴上加拿大樹膠，蓋上蓋玻片封固。待樹膠略干后，貼上標箋，切片標本就可使用。
.甲苯胺藍液染色方法: (一)1.甲苯胺藍液 甲苯胺藍0.5g 蒸餾水定容至100ml 2.冰醋酸液 冰醋酸0.5ml蒸餾水定容至100ml 染色步驟 1.組織切片常規脫蠟至水 2.入甲苯胺藍液30min 3.稍水洗 4.入冰醋酸液分化，直到胞核和顆粒清晰。 5.稍水洗，用冷風吹干 6.二甲苯透明，中性樹膠封固 (二) ?、偾衅撆D至水。 ?、谡麴s水浸洗3次。 ?、?.1%甲苯胺藍液浸染10min。 ?、芩?，洗去多余染液。 ?、莞骷壘凭撍?。 ?、薅妆酵该?，中性樹膠封固。①石蠟切片常規脫蠟至水；②滴加1%甲苯胺藍液染色5min～8min(染液配制：1g甲苯胺藍溶于100ml蒸餾水，滴加媒染劑2ml，置于60℃溫箱2h，然后移 置室溫備用)；③蒸餾水洗；④95%乙醇急速分化；⑤無水乙醇脫水，二甲苯透明中性樹膠封固.